免疫組化檢測(cè)定義:
免疫組化檢查(immunohistochemistry examination)指應(yīng)用免疫學(xué)抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色,確定組織或細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)的定量檢查。
免疫組化檢查原理
免疫組織化學(xué)利用抗體和抗原具有高度特異性結(jié)合的原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái),以此作為抗原或半抗原,通過(guò)免疫動(dòng)物后獲得特異性抗體,再以此抗體探測(cè)組織或細(xì)胞中的同類抗原。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無(wú)色的,因此必須借助組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯現(xiàn),以達(dá)到對(duì)未知抗原進(jìn)行定性、定位或定量。
免疫組化檢查分類
1. 按標(biāo)記物質(zhì)的種類分類,如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過(guò)氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標(biāo)法和免疫金銀法等。
2. 按染色步驟分類,可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步、三步或多步法)。與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。
3. 按結(jié)合方式分類,可分為:①抗原-抗體結(jié)合,如過(guò)氧化物酶-抗過(guò)氧化物酶(pap)法;②親和連接,如卵白素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物(abc)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)(sp)法等。其中sp法是比較常用的方法;③聚合物鏈接,如即用型二步法,此方法尤其適合于內(nèi)源性生物素含量高的組織抗原檢測(cè)。
免疫組化常用方法
1. 免疫熒光法
是早期建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。
2. 免疫酶標(biāo)法
免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù)。先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過(guò)光鏡或電鏡,對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前常用的技術(shù)。主要優(yōu)點(diǎn)是定位準(zhǔn)確,對(duì)比度好,染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存,適用于光鏡、電鏡研究等。目前免疫酶標(biāo)法在病理診斷中廣為使用的有abc法、sp三步法、即用型二步法檢測(cè)系統(tǒng)等。
3. 免疫膠體金技術(shù)
是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標(biāo)記物。膠體金能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白,對(duì)蛋白的生物學(xué)活性沒(méi)有明顯影響。用膠體金標(biāo)記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌a蛋白)等作為探針,可對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性、定位,甚至定量。特別適合于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記定位。也適合進(jìn)行光鏡觀察。
義翹神州提供免疫組化檢測(cè)優(yōu)勢(shì):
• 定位準(zhǔn)確、形態(tài)與功能相結(jié)合
• 配套*的儀器設(shè)備,保障整套實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行
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• 組織庫(kù)豐富,擁有多種屬組織蠟塊
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免疫組化檢測(cè)服務(wù)內(nèi)容:
①石蠟包埋(3-5個(gè)工作日)
組織石蠟包埋:30元/個(gè)
細(xì)胞石蠟包埋:40元/個(gè)
②切片(2-3個(gè)工作日)
石蠟切片:10元/片
冰凍切片:30元/片
③ihc檢測(cè) (酶單染)(3-5個(gè)工作日)
30元/片
④拍照成像(2-3個(gè)工作日)
60-120元/片
⑤半定量分析(2-3個(gè)工作日)
20元/指標(biāo)/片
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