gsk elisa kit應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人骨特異性堿性磷酸酶水平。用純化的人骨特異性堿性磷酸酶抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入骨特異性堿性磷酸酶，再與hrp標(biāo)記的骨特異性堿性磷酸酶抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物tmb顯色。tmb在hrp酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的骨特異性堿性磷酸酶呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（od值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人骨特異性堿性磷酸酶濃度。
gsk elisa kit使用要求如下：
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。
gsk elisa kit嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
關(guān)鍵詞：酶標(biāo)儀