胖大海lamp鑒定試劑盒使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10e2-10e7 拷貝/μl 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μl 熒光 pcr 專用模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μl 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10e8 拷貝/μl,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10e7 拷貝/μl 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μl 1×10e7 拷貝/μl 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10e6 拷貝/μl 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μl 1×10e6 拷貝/μl 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10e5 拷貝/μl 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 dna 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 dna,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 n 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 n+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qpcr 反應(yīng)(20μl 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 n+9 個(gè) pcr 管,其中 n+2 個(gè)用于上步得到的 n+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 pcr 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 n+4 個(gè) pcr 管,其中 n+2 個(gè)用于上步得到的 n+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 pcr 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于pcr 陽(yáng)性對(duì)照(用第一步稀釋得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線系列稀釋液的第 4 號(hào)做模板)。
活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體
銜接蛋白β抗體
銜接蛋白γ/γ-adaptin抗體
水通道蛋白-9抗體
膜粘連蛋白a3抗體
膜粘連蛋白 a4抗體
自噬相關(guān)蛋白8a抗體
磷酸化蛋白激酶b抗體
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
磷酸化蛋白激酶b抗體
脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體
蛋白激酶錨定蛋白13抗體
ap-1μ2抗體
肥大細(xì)胞膜抑制性受體allergin1抗體
腦鈉通道蛋白1抗體
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位b1抗體
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白g超家族成員2抗體
甲胎蛋白抗體
毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體
atp結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白lim蛋白3抗體
酸性鈣調(diào)蛋白3抗體
磷酸化cd156b抗體