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        番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)LAT52基因PCR試劑盒常見問題與解決方法

        發(fā)布時(shí)間:2024-08-19
        番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)lat52基因pcr試劑盒常見問題與解決方法:
        陽性對(duì)照、待測(cè)樣本均無條帶。
        1)、pcr反應(yīng)體系或反應(yīng)條件不合適。
        2)、pcr試劑保存不當(dāng)失去活性。
        3)、引物設(shè)計(jì)問題。
        解決方法:
        1)使用梯度pcr摸索pcr反應(yīng)條件。
        2)2× pcr mix應(yīng)保存于-20℃,使用時(shí)避免反復(fù)凍融。若使用頻繁,可在4℃短時(shí)間存放。
        3)嘗試重新設(shè)計(jì)引物進(jìn)行檢查。
        陽性對(duì)照有目的條帶,待測(cè)樣本無條帶或條帶弱。
        1、不當(dāng)儲(chǔ)存或長期儲(chǔ)存引起試劑活性喪失。
        2、加入組織裂解液過量。
        3、樣本裂解混合液保存不當(dāng)或保存時(shí)間過久,dna基因組已經(jīng)降解。
        4、模板加入量不適合。
        5、pcr循環(huán)數(shù)不足。
        解決方法:
        1、使用新鮮的試劑。
        2、增大反應(yīng)體系,或減少裂解液的用量。
        3、裂解混合液液可在4℃保存2-3天,盡量使用新制備的裂解液混合液進(jìn)行pcr。
        4、在反應(yīng)體系10-20%范圍內(nèi)優(yōu)化模板加入量。反應(yīng)效性能較差時(shí),可以降模板濃度調(diào)節(jié)到低于10%的范圍。
        5、適當(dāng)增加pcr的循環(huán)數(shù),推薦在35-40循環(huán)為佳。因?yàn)槟0鍙?fù)雜,一般pcr反應(yīng)要比用純化的 dna模板多5-10個(gè)循環(huán)為佳。
        上一個(gè):紫外線殺菌器應(yīng)用廣泛
        下一個(gè):熱電阻和熱電偶的差別

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