elisa測定的原理是使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。
用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開，后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據(jù)顏色反應的深淺刊物定性或定量分析。
由于酶的催化頻率很高，故可極大地地放大反應效果，從而使測定方法達到很高的敏感度。有時候會出現(xiàn)elisa試劑盒測定值與文獻報道相差太大的情況，以下內容分析elisa試劑盒測定值與文獻報道相差太大的幾個原因：
一、同一種材料，不同處理、不同發(fā)育狀態(tài)和不同器官其生化指標可能發(fā)生很大變化。因此，能夠直接用來比較的文獻資料本來就不多。
二、生化測定的首要目的是比較處理內和處理間該指標的變化。同時，要測定絕dui值，往往是很可能甚至不可能的。因此，追求的不是絕dui值而是相對值。
三、測定值如果與文獻報道相差太大，首先應該檢查單位是否一致，包括摩爾還是毫摩爾，是干重、鮮重還是蛋白質濃度，是分鐘還是秒，等等。其次，檢查計算是否有誤？后，如果相差不是數(shù)量級，通常是很正常的。
四、用不同測定方法和不同測定條件下得到的測定值可能存在很大差異。因此，如果測定方法不同，同一樣品的測定值通常是不可以直接比較的。這也是建議使用人elisa試劑盒測定的理由之一。因為不同作者用同一試劑盒測定的數(shù)據(jù)才是可以相互比較的。