微量加樣器
微量加樣器(移液器)出現(xiàn)于1956年,由德國(guó)生理化學(xué)研究所的科學(xué)家schnitger發(fā)明,其后
,在1958年德國(guó)公司開始生產(chǎn)按鈕式微量加樣器,成為一家生產(chǎn)微量加樣器的公司。這
些微量加樣器的吸液范圍在1—1000μl之間,適用于臨床常規(guī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室使用。微量加樣器發(fā)展
的不但加樣更為精確,而且品種也多種多樣,如微量分配器、多通道微量加樣器等,其加樣的物
理學(xué)原理有下面兩種:
①使用空氣墊(又稱活塞沖程)加樣;
②使用無(wú)空氣墊的活塞正移動(dòng)(positivedisplacement)加樣。上述兩種不同原理的微量加樣器有
其不同的特定應(yīng)用范圍。
空氣墊加樣器
移液器
移液器
活塞沖程(空氣墊)加樣器可很方便地用于固定或可調(diào)體積液體的加樣,加樣體積的范圍在小于1ul
至l0ml之間。加樣器中的空氣墊的作用是將吸于塑料吸頭內(nèi)的液體樣本與加樣器內(nèi)的活塞分隔開
來(lái),空氣墊通過(guò)加樣器活塞的彈簧樣運(yùn)動(dòng)而移動(dòng),進(jìn)而帶動(dòng)吸頭中的液體,使體積和移液吸頭中
高度的增加決定了加樣中這種空氣墊的膨脹程度。因此,活塞移動(dòng)的體積必須比所希望吸取的體
積要大約2%~4%,溫度、氣壓和空氣濕度的影響必須通過(guò)對(duì)空氣墊加樣器進(jìn)行結(jié)構(gòu)上的改良而降
低,使得在正常情況下不至于影響加樣的準(zhǔn)確度。一次性吸頭是本加樣系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分
,其形狀、材料特性及與加樣器的吻合程度均對(duì)加樣的準(zhǔn)確度有很大的影響。
活塞正移動(dòng)
以活塞正移動(dòng)為原理的加樣器和分配器與空氣墊加樣器所受物理因素的影響不同,因此,在空氣
墊加樣器難以應(yīng)用的情況下,活塞正移動(dòng)加樣器可以應(yīng)用,如具有高蒸汽壓的、高黏稠度以及密
度大于2.0g/cm3的液體;又如在臨床聚合酶鏈反應(yīng)(pcr)測(cè)定中,為防止氣溶膠的產(chǎn)生,使
用活塞正移動(dòng)加樣器。活塞正移動(dòng)加樣器的吸頭與空氣墊加樣器吸頭有所不同,其內(nèi)含一個(gè)可與
加樣器的活塞耦合的活塞,這種吸頭一般由生產(chǎn)活塞正移動(dòng)加樣器的廠家配套生產(chǎn),不能使用通
常的吸頭或不同廠家的吸頭。
多通道加樣器
多通道加樣器的原理與上述相同。多通道加樣器通常為8通道或12通道,與8x12=96孔微孔板一致
。多通道加樣器的使用不但可減少實(shí)驗(yàn)操作人員的加樣操作次數(shù),而且可提高加樣的精密度。
電子和分配器
多道可調(diào)移液器
多道可調(diào)移液器
電子加樣器和分配器的原理與上述相同。電子加樣器和分配器為半自動(dòng)加樣系統(tǒng),電子加樣器最
大的優(yōu)點(diǎn)是其具有很高的加樣重復(fù)性,應(yīng)用范圍廣。
使用步驟編輯
移液器在進(jìn)行分析測(cè)試方面的研究時(shí),一般采用移液器(pipette)量取少量或微量的液體。對(duì)于
移液器的正確使用方法及其一些細(xì)節(jié)操作,是很多人都會(huì)忽略的,分幾個(gè)方面詳細(xì)敘述。
量程的調(diào)節(jié)
在調(diào)節(jié)量程時(shí),如果要從大體積調(diào)為小體積,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,順時(shí)針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;但
如果要從小體積調(diào)為大體積時(shí),則可先逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過(guò)量程的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體
積,這樣可以保證量取的精確度。
在該過(guò)程中,千萬(wàn)不要將按鈕旋出量程,否則會(huì)卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞了移液器。
槍頭的裝配
在將槍頭(pipette tips)套上移液器時(shí),很多人會(huì)使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這是錯(cuò)誤的做
法,因?yàn)檫@樣會(huì)導(dǎo)致移液器的內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時(shí)撞擊力而變得松散,甚至?xí)?br>導(dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移液器(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)
即可使其緊密結(jié)合。如果是多道(如8道或12道)移液器,則可以將移液器的道對(duì)準(zhǔn)個(gè)槍
頭,然后傾斜地插入,往前后方向搖動(dòng)即可卡緊。槍頭卡緊的標(biāo)志是略為超過(guò)o型環(huán),并可以看到
連接部分形成清晰的密封圈。
移液的方法
移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時(shí),移液器保持豎直狀態(tài),將槍
頭插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤(rùn)濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或
密度與水不同的液體時(shí))。這時(shí)可以采取兩種移液方法。
一是前進(jìn)移液法。用大拇指將按鈕按下至停點(diǎn),然后慢慢松開按鈕回原點(diǎn)(吸取固定體積的
液體)。接著將按鈕按至停點(diǎn)排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點(diǎn)吹出殘余的液體。
最后松開按鈕。
二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其
原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體,轉(zhuǎn)移液體的時(shí)候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二
停點(diǎn),慢慢松開按鈕至原點(diǎn),吸上之后,斜靠一下容器壁將多余液體沿器壁流回容器。接著將按
鈕按至停點(diǎn)排出設(shè)置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于停點(diǎn)(千萬(wàn)別再往下按),
取下有殘留液體的槍頭,棄之吸上之后,斜靠一下容器壁將多余液體沿器壁流回容器 [1] 。
移液器放置
使用完畢,可以將其豎直掛在移液器架上,但要小心別掉下來(lái)。當(dāng)移液器槍頭里有液體時(shí),切勿
將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
關(guān)鍵詞:移液器