該試劑盒基于自主研發(fā)的磁珠,可在不吸附雜質(zhì)的情況下特異性捕獲外泌體,實(shí)現(xiàn)外泌體分離的高純度和高回收率。它具有操作簡單、純度高、回收率高的優(yōu)點(diǎn),特別適合于從血漿和血清中分離外泌體。隔離的外泌體可用于wb分析、nta或納米流粒度分析、電子顯微鏡檢測、組學(xué)研究、細(xì)胞和動(dòng)物功能研究等等。
艾美捷血漿/血清外泌體提取試劑盒:
目錄號:a-exo006
尺寸:50t
儲(chǔ)存:收到后,按照儲(chǔ)存說明儲(chǔ)存套件組件。保質(zhì)期為12月。
血漿/血清外泌體提取試劑盒組成:
需要但未提供的材料:
·高速冷凍離心機(jī)
·平臺(tái)振動(dòng)篩
·1.5 ml離心管
·磁選機(jī)架
·超濾膜(mwco 10kda)
樣品預(yù)處理:
1.細(xì)胞去除:將樣品在4℃下以300 g的速度離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的離心管中。對于無細(xì)胞的樣品,可以跳過這一步驟。
2.細(xì)胞和細(xì)胞碎片去除:將樣品在4℃下以2000 g的速度離心10分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的離心管中。
3.大顆粒物去除:將從步驟2獲得的上清液在4℃下以14000 g的速度離心30分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的離心管中。
富集外泌體:
1.取500μl預(yù)處理后的樣品(如果處理的樣品體積低于500μl,只需使用溶液a將樣品體積補(bǔ)至500μl),加入10 mg(±10%變異)的exomag外泌體磁珠到一個(gè)1.5 ml的離心管中。將離心管固定在平臺(tái)搖床上,在室溫下以17 rpm的速度孵育30分鐘。
2.將上述離心管放在磁分離架上,靜置5秒鐘,倒掉上清液。
3.加入1 ml溶液a,通過倒置離心管混合,將其放在磁分離架上靜置5秒鐘,倒掉上清液。
4.重復(fù)步驟3兩次,保留exomag外泌體磁珠。
分離外泌體:
1.向exomag外泌體磁珠中加入100μl洗脫緩沖液,渦旋30秒鐘。將離心管固定在平臺(tái)搖床上,在室溫下以17 rpm的速度孵育30分鐘。
2.將離心管放在磁分離架上,靜置5秒鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的1.5 ml離心管中。這個(gè)上清液中含有外泌體。
外泌體不應(yīng)長時(shí)間存放在洗脫緩沖液中。如果需要長期存儲(chǔ),請使用超濾管(分子量截留率10 kda)用pbs溶液替換洗脫緩沖液。
該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。